高效液相色谱仪应用常见问题分析

本资料包含pdf文件1个，下载需要1积分

食品检验等领域都被广泛应用，高效液相色谱仪具有分析效率高、分辨率高等优势，尽管如此，高效液相色谱仪在使用过程中仍然有-些常见的问题，为了提高工作效率，探讨相应的解决措施十分必要。

1、高效液相色谱仪检测结果的不确定度分析--以检测酱油中苯甲酸为例1.1检测方法戚荣平根据 GB/T5009.29-2003技术标准，将标准溶液的浓度确定为 0.05mg/ml，酱油样品采用超纯水定容，采用 O.45um水系滤表 1：标准曲线数据膜进行过滤，分别配置苯甲酸浓度为 10ng/ul、3Onedul、20ng/ul、50ng/ul的标准溶液，均重复检测 3次，检测后对标准曲线数据进行统计分析，具体数据如表 1所示。

标准溶液中苯甲酸浓度 (x) 项目 检测次数10ng/ul 30ng/ul 20ng/ul 50ng/ull 722.42 2191.33 1460.18 36l1.882 722.78 2189.29 1457.39 3606.18 峰面积 (y)3 723.38 2187.25 1454.60 3600.49平均 722.86 2189.29 1457.39 3606.18r 0.99997按 照 ybxa 进 行 计 算 ， 结 果 为： 吸管、容量瓶、峰面积量化误差、分析仪器。

.， - 1. Ⅱ. -i%-蛐 口 .上 昔 m 牲 恤 aO.11)j)斗O， b，Z. Z 3/ 姒予佚 芏 Jo.n1 1 2n nn矿I1.00362 - 恫n ；巴 旆串- 7 1 10 11v上 - . 。 I Y l l - 0 。 l- J，j选取 6份酱油样品，具体检测结果如表2 VI - 单向阀故障主要是因为在球与阀座密封表 2：酱油样品检测结果 为：度道 . . .蕉 釜 鎏气酱油样品 峰面积 (y) 苯甲酸浓度(x) Jf1n144。0 fXIgq n.00t8。 - 2 阀座粘连阻死。为了防止上述现象 ，应使用1 29l5.75977 40.28384 V ” HPLC级的溶剂作为流动相，这样可以防止单2 2924.25142 40.40141. 溶量瓶引起的相对不确定度Ure-㈤ 胄粱 言磊 兰 眷染萍 襄 3 2912. 25478 40.235324 2914.36889 40.26458～ 。

， ， ， 粒污染的泵。当气泡进入阀中之后，会导致 00·0577 0 lm2q。 0· 硝 - fl f1R×1n-2 宝石球难以回到阀座，就会出现倒流现象，5 2922.67920 40.37964 V： 此时泵的压力和流速也会发生很大的变化，6 2915.23587 40.27659 综上所述，苯甲酸标准溶液引起的相对 遇到这种情况时，应该迅速打开泄液阀，采平均 29l7.42499 40.30690 不确定度 Urel(3)为： 用大流量液体来冲洗泵，直到排出液呈现出求得 苯 甲酸浓度 检测 的平 均误 差 为0.02744。

1.2不确定度分析1.2.1重负检测产生的相对不确定度重负检测产生的相对不确定 Urel(1)度按照下式计算：监 埔 l1 I X J解得 Urel(1)0.02744/40.306906.81X101.2.2拟合工作 曲线产生的相对不确定度拟 合工 作 曲线产 生 的相对 不确 定度Urel(2)按照下式计算：t ∞ b解得 Urel(2 3.64×10。

12-3苯 甲酸标准溶液引起的相对不确定度(1)苯甲酸标准贮存液引起的相对不确定度 Urel(co)为：1%/20.5%(2)移液管引起的相对不确定度 Urel(v )： 0 52×10。2(5)峰面积量化误差引起的相对不确定度 Urel(4)为：-O .0 0001 l。 O× l0-92.f 3×v。

(6)分 析仪器引起的相对不确 定度Urel(5)为：： 9 (× 、，l J.6(7)合成标准不确定度为：他1tu u 3l÷十 ：.64tTd 4 0 × J u 2 1 1j5l ·0(8)有效 自由度为：V 4 4 4 45 9 5O SO： 50(9)可信 区间取 95%，查 t表可知t9 502.01，因此扩展不确定度 U为：U uI ×t5500 52可见不确定度的来源主要有重负检测、拟合工作曲线、标准贮存液、移液管、刻度的故障，为了避免这-问题 ，系统中应尽量不使用强酸强碱溶液，当强酸强碱溶液应用到液相色谱系统中之后，很容易损坏柱塞杆以及密封垫。另-方面，要想使柱塞在泵头自由运动，并且确保流动相不发生渗漏，就必须要使密封垫圈与运动的柱塞杆接触紧密，因此密封垫圈很容易受到磨损，在实际工作中应该定期更换密封垫圈，这样能够有效避免泵系统遭到污染。

总结：高效液相色谱仪主要是 由溶液贮存设备、高压泵、进样系统、色谱分离柱、检测器、数据处理系统组成，具有分析效率高、分辨率高等优势，笔者在此分析了高效液相色谱仪在实际应用中的常见问题，并介绍了相应的解决措施，希望对相关工作有所帮助。